流式细胞术分析B淋巴细胞

流式细胞术分析B淋巴细胞

B淋巴细胞

B淋巴细胞是免疫系统的重要组成成分,主要功能是介导体液免疫应答,依靠终末分化细胞——浆细胞分泌抗体发挥强大的免疫效应作用。实验证明,B淋巴细胞是一个异质性群体,这一特性赋予B淋巴细胞功能的多样性,从而能有效地识别外界和机体内部的复杂性抗原。在人外周血中,根据B细胞的发育阶段及功能的不同,可将B细胞分为初始成熟B细胞、记忆B细胞和浆细胞。记忆B细胞又可分为IgM记忆B细胞和类型转换的记忆B细胞。

前B细胞在骨髓中分化为成熟B细胞后历经阴性选择(清除自身反应性B细胞克隆)、表面表达mIgM和B220,随后离开骨髓,参与循环。人外周血的B细胞根据CD19和CD27的表达可分为两个亚群:CD19+CD27–B细胞和CD19+CD27+B细胞。其中,CD27–B细胞属于初始成熟B细胞,CD27+B细胞被定义为记忆B细胞。记忆B细胞产生于生发中心,是初次应答后克隆消除保留下来的高亲和力细胞,当再次遭遇相同抗原时,能迅速活化增殖,并分化为浆细胞发挥免疫效应。记忆B细胞产生后,和初始B细胞一起参与外周循环。人类记忆B细胞占全部外周B淋巴细胞的40%~60%,根据IgM和IgD表达与否,记忆B细胞可进一步分为IgM记忆B细胞(CD19+CD27+IgM+IgD+)和类型转换的记忆B细胞(CD19+CD27+IgM–IgD–),两者所占比例各约为50%。

Eur J Immunol,2011,41(11):3261-3269.

人外周血中B细胞的比例

利用流式细胞术检测正常人外周血单个核细胞中B细胞及其表面表达CD27的比例

Eur J Immunol,2011,41(11):3261-3269.

人外周血中B细胞的亚群分布

利用流式细胞术,设门于CD19+B淋巴细胞群后,应用抗IgD荧光抗体和抗CD27荧光抗体分析外周血B细胞亚群分布情况

免疫学杂志,2011,27(5):407-410.

人外周血中B细胞IgD与CD38表达情况

根据B细胞表面IgD与CD38表达与否,区分人B细胞各亚群分布

2. B1和B2淋巴细胞

根据CD19和CD5的表达情况,可分为B1细胞(CD5+CD19+)和B2细胞(CD5–CD19+)。CD5表达于未成熟的B1细胞表面,是B1细胞的重要标志。B1细胞产生抗体有两个特点:

  1. 不发生体细胞突变,无亲和力成熟,多为低亲和力的IgM、IgA 和IgG3,参与抗细菌感染的黏膜免疫应答,不产生记忆细胞;
  2. 能产生多种针对自身抗原的抗体,与自身免疫病相关。B2细胞即成熟的B细胞,产生高亲和力抗体,同时表达mIgM和mIgD,行使体液免疫功能,发挥抗原提呈和免疫调节作用。B2细胞是成熟的B细胞,B1细胞是B2细胞的前体。
编辑于 2021-04-19 11:34