免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对组织切片或细胞标本中的某些多肽和蛋白质等大分子物质进行原位定性、定位或定量研究的实验技术。
IHC定量研究中免疫组化图片该如何分析？今天就使用ImageJ软件给大家分享免疫组化图片分析方法。ImageJ软件是美国NIH开发的一款在生物医学中应用十分广泛的免费软件，下载地址为https://imagej.nih.gov/ij/ 。
该软件的显著优势是开源、免费，不受电脑系统（官网提供适用不同操作系统的版本）的限制且功能强大。
先前分享的10步填上免疫组织化学（IHC）的坑的文章中介绍了使用IHC Profiler插件对免疫组化结果进行打分，有兴趣可以点这里。今天给大家分享另一种免疫组化图片分析方法，分享之前先介绍两个概念：
1、什么是灰度值（Gray value）？
灰就是不够黑，介于黑白之间。用于显示的灰度图像通常用每个采样像素8 bit的非线性尺度来保存，这样可以有256种灰度（8bits即2^8=256）。
使用直线工具沿灰阶变化画直线：